亮蓝厂家-临夏亮蓝-富舜新材料实力厂家(查看)

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考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量的原理是什么

在酸性条件下，考马斯亮兰G-250染料与蛋白质疏水区结合，导致da吸收峰由465 nm 变为595 nm，同时颜色也由棕色变为蓝色，该蓝色化合物颜色的深浅与蛋白质浓度的高低成正比关系。将蛋白质样品或稀释的BSA 与Bradford试剂混合，测量在595 nm处的吸收值，在建立由一系列稀释的BSA建立的标准曲线的情况下，蛋白质的浓度可以根据标准曲线而确定。

考马斯亮蓝G-250（Coomassie brilliant blue G-250）测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。在游离状态下呈红色，da光吸收在488nm；当它与蛋白质结合后变为青色，蛋白质-色素结合物在595nm波长下有da光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比，因此可用于蛋白质的定量测定。蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合在2min左右的时间内达到平衡，完成反应十分迅速；其结合物在室温下1h内保持稳定。

该法是1976年Bradford建立，试剂配制简单，操作简便快捷，反应非常灵敏，灵敏度比Lowry法还高4倍，可测定微克级蛋白质含量，测定蛋白质浓度范围为0～1 000μg/mL，xaio可测2.5μg/mL蛋白质，是一种常用的微量蛋白质快速测定方法。

考马斯亮蓝有G250和R250两种。其中考马斯亮蓝G250由于与蛋白质的结合反应十分迅速，常用来作为蛋白质含量的测定。考马斯亮蓝R250与蛋白质反应虽然比较缓慢，临夏亮蓝，但是可以被洗脱下去，所以可以用来对电泳条带染色。

亮蓝运用：依据在我国《食用添加剂应用质量标准》（GB2760-1996）中要求：亮蓝可用作果味型饮料（液、固态）、水果汁型饮料、碳酸饮料、配制酒、糖块、点心上彩装、红绿丝、水果罐头、浓缩汁、青梅、对虾片，使用量为0.025g/kg；冰激凌，使用量为0.021999g/kg。红绿丝的使用量可翻倍；果味粉添加剂添加量按稀释液倍率的50%添加依据在我国《食用添加剂应用质量标准》（GB2760-1996）中要求：亮蓝可用作果味型饮料（液、固态）、水果汁型饮料、碳酸饮料、配制酒、糖块、点心上彩装、红绿丝、水果罐头、浓缩汁、青梅、对虾片，使用量为0.025g/kg；冰激凌，使用量为0.021999g/kg。红绿丝的使用量可翻倍；果味粉添加剂添加量按稀释液倍率的50%添加

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编码 GB 08.007、INS 133、C.I.（1975）42090

性状 红紫色均匀粉末或颗粒，有金属光泽，无臭。易溶于水（18.7g/100mL，21℃），呈绿光蓝色溶液，溶于乙醇（1.5g/100mL，95%乙醇，21℃）、甘油、丙二醇。耐光、耐热性强。对柠檬酸、酒石酸、碱均稳定。

制法 由苯jia醛邻磺酸与N-乙ji，N-（3-磺基苄基）-苯an缩合后氧化制得。