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考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量的原理是什么

在酸性条件下，考马斯亮兰G-250染料与蛋白质疏水区结合，导致da吸收峰由465 nm 变为595 nm，食用蓝色1号多少钱，同时颜色也由棕色变为蓝色，该蓝色化合物颜色的深浅与蛋白质浓度的高低成正比关系。将蛋白质样品或稀释的BSA 与Bradford试剂混合，测量在595 nm处的吸收值，在建立由一系列稀释的BSA建立的标准曲线的情况下，食用蓝色1号供应商，蛋白质的浓度可以根据标准曲线而确定。

考马斯亮蓝G-250（Coomassie brilliant blue G-250）测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。在游离状态下呈红色，da光吸收在488nm；当它与蛋白质结合后变为青色，三亚食用蓝色1号，蛋白质-色素结合物在595nm波长下有da光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比，因此可用于蛋白质的定量测定。蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合在2min左右的时间内达到平衡，完成反应十分迅速；其结合物在室温下1h内保持稳定。

该法是1976年Bradford建立，试剂配制简单，操作简便快捷，反应非常灵敏，灵敏度比Lowry法还高4倍，可测定微克级蛋白质含量，测定蛋白质浓度范围为0～1 000μg/mL，xaio可测2.5μg/mL蛋白质，是一种常用的微量蛋白质快速测定方法。

考马斯亮蓝有G250和R250两种。其中考马斯亮蓝G250由于与蛋白质的结合反应十分迅速，常用来作为蛋白质含量的测定。考马斯亮蓝R250与蛋白质反应虽然比较缓慢，但是可以被洗脱下去，所以可以用来对电泳条带染色。

亮蓝

中文别名 [[[4-[N乙机-N-（3′-磺基苯甲ji）-氨基、苯ji、-（2′-磺基苯ji）-亚甲ji]-2，5-亚环己二烯基]-（3′-磺基苯甲ji）-乙机胺二钠盐、C.I.食品蓝2(42090)、食用亮蓝、双[4-(N-乙机-N-3-磺酸苯甲ji)氨基苯ji]-2-磺酸甲ben基二钠盐、食用色素亮蓝；罂红二钠盐;亮蓝1、酸性蓝 9 [CI 42090]、蓝 1 [CI 42090];食品蓝1/羊毛罂红A;食用青色1号(日本名)、食用色素蓝1号;乙机-间磺基苄基-{4'-[4''-(间磺基苄基-乙机氨基)苯ji-邻磺基苯ji亚甲ji]-2'，5-亚苯ji}-氢氧化铵内盐之二钠盐、食用色素蓝1号、乙机-间磺基苄基-{4'-[4''-(间磺基苄基-乙机氨基)苯ji-邻磺基苯ji亚甲ji}-2'5-亚苯ji}-氢氧化铵内盐之二钠盐;食品蓝1/羊毛罂红A /亮蓝。CAS NO.3844-45-9EINECS 223-339-8编码GB 08.007、INS 133、C.I.（1975）42090性质易溶于水（18.7g/100mL，21℃），呈绿光蓝色溶液，溶于乙醇（1.5g/100mL，95%乙醇，21℃）、甘油、丙二醇。耐光、耐热性强。对柠檬酸、酒石酸、碱均稳定。制法 由苯甲quan邻磺酸与N-乙机，N-（3-磺基苄基）-苯an缩合后氧化制得。CBNumber:CB8495130分子式:C37H34N2Na2O9S3分子量:792.85

亮蓝为有金属质感的浅紫色至古铜色颗粒物或粉末状，无臭。溶于于水，溶液呈亮蓝色；可溶精、丙二醇和凡士林。耐光性性、耐温性、耐碱性、耐盐性和耐微生物性非常好，耐酸性和耐氧化还原反应特点。弱酸性时呈青色，强碱时呈黄色，在烧开溶液中呈蓝紫色。亮蓝的饱和度极强，食用蓝色1号批发，一般全是与别的服用添加剂相互配合应用，使用量小，在0.0005%~0.01%中间。装饰艺术蔬菜水果、可可制品、巧克力朱古力制品(包含可可脂朱古力及制品）及其糖块（05.01.01可可制品、05.04装饰设计糖块、顶饰和甜汁以外）、点心上彩装。客户在应用本产品前要认真阅读GB2760《食用添加剂应用质量标准》，每个纯色种类的应用范畴和使用量会大不一样。